該怎么選擇正確的超濾管呢?
一、選擇正確的截留分子量(MWCO)
截留分子量是根據(jù)已知分子量(以道爾頓為單位)的溶質(zhì)保持>90%的能力而給出的額定值。對于蛋白質(zhì),建議選擇的截留分子量是需要截留的溶質(zhì)分子質(zhì)量的1/6-1/3。如果首先考慮流速的因素,則選擇需要截留的溶質(zhì)分子質(zhì)量的1/3作為膜的截留分子量;如果截留效果作為主要考慮,則選擇需要截留的溶質(zhì)分子質(zhì)量的1/6作為膜的截留分子量。
下圖是蛋白質(zhì)應(yīng)用中MWCO選擇:
下圖是核酸應(yīng)用中MWCO選擇:
下圖是病毒應(yīng)用中MWCO選擇:
二、選擇正確的超濾管容量:
超濾管類型 | zui大樣品體積 | zui終濃縮物的體積 | zui大離心力 | 殘留體積(死體積) |
Nanosep超濾管 | 500ul | 15ul | 14000Xg | <5ul |
Microsep Advance超濾管 | 5ml
| 65 μL (吊桶式轉(zhuǎn)頭) | 7,500 x g (超濾) | 40ul |
Macrosep Advanc超濾管 | 20ml | 450 μL (吊桶式轉(zhuǎn)頭) | 5,000 x g (超濾) | 80ul |
Jumbosep超濾杯 | 60ml | 3.5-4ml | 3000Xg(水平轉(zhuǎn)子) | 0.2ml |